Мона Лиза Леонардо да Винчи – одно из самых известных произведений живописи во всём мире.

В наше время эта картина находится в парижском Лувре.

Создание картины и изображённая на ней модель, были окружены множеством легенд и слухов, и даже сегодня, когда белых пятен в истории «Джоконды» практически не осталось, мифы и легенды продолжают ходить среди множества не особенно образованных людей.

Кто такая Мона Лиза?

Личность изображённой девушки на сегодняшний день вполне известна. Считается, что это Лиза Герардини – известная жительница Флоренции, принадлежавшая к аристократической, но обедневшей семье.

Джоконда – это, по всей видимости, её фамилия в замужестве; супругом её был успешный торговец шёлком Франческо ди Бартоломео ди Заноби дель Джокондо. Известно, что Лиза с мужем родили шестерых детей и вели размеренную жизнь, характерную для обеспеченных граждан Флоренции.

Можно думать, что брак был заключён по любви, но при этом имел и дополнительные выгоды для обоих супругов: Лиза вышла замуж за представителя более богатой семьи, а Франческо через неё породнился со старинным родом. Совсем недавно, в 2015 году, учёными была обнаружена и могила Лизы Герардини – возле одной из старинных итальянских церквей.

Создание картины

Леонардо да Винчи сразу взялся за этот заказ и отдавался ему полностью, в буквальном смысле с какой-то страстью. И в дальнейшем художник был тесно привязан к своему портрету, везде носил его с собой, а когда в позднем возрасте решил уехать из Италии во Францию, то вместе с несколькими избранными своими работами он захватил с собой и «Джоконду».

С чем было связано такое отношение Леонардо к этой картине? Есть мнение, что великий художник имел с Лизой любовную связь. Однако не исключено, что живописец ценил эту картину как пример наивысшего расцвета своего таланта: «Джоконда» действительно получилась необыкновенной для своего времени.

Мона Лиза (Джоконда) фото

Интересно, что Леонардо так и не отдал портрет заказчику, а увёз его с собой во Францию, где её первым владельцем стал король Франциск I. Возможно, такой поступок мог быть связан с тем, что мастер не закончил полотно к сроку и продолжал написание картины уже после отъезда: о том, что свою картину Леонардо «так и не окончил», сообщает знаменитый писатель эпохи Возрождения Джорджо Вазари.

Вазари, в своей биографии Леонардо, сообщает множество фактов о написании этой картины, однако не все они достоверны. Так, он пишет, что художник создавал картину в течение четырёх лет, что является явным преувеличением.

Пишет он также, что во время позирования Лизы в студии находилась целая группа шутов, развлекавших девушку, благодаря чему Леонардо удалось изобразить на лице её улыбку, а не стандартную для того времени грусть. Однако, скорее всего, рассказ о шутах Вазари сочинил сам для развлечения читателей, используя фамилию девушки – ведь «Джоконда» означает «играющая», «смеющаяся».

Однако можно отметить тот факт, что Вазари привлекала в этой картине не столько реалистичность как таковая, сколько удивительная передача физических эффектов и мельчайших деталей образа. Судя по всему, писатель описывал картину по памяти или же по рассказам других очевидцев.

Некоторые мифы о картине

Ещё в конце XIX века Грюйе писал, что «Джоконда» вот уже несколько столетий буквально лишает людей рассудка. Многие задумывались, созерцая этот удивительный портрет, из-за чего он оброс множеством легенд.

• По одной из них, на портрете Леонардо аллегорически изобразил… самого себя, что якобы подтверждается совпадением мелких деталей лица;
• По другой, на картине изображён юноша в женской одежде – например, Салаи, ученик Леонардо;
• Ещё одна версия говорит о том, что на картине изображена просто идеальная женщина, некий абстрактный образ. Все эти версии в настоящее время признаны ошибочными.

«Мо́на Ли́за» («Джоко́нда»; полное название — Портре́т госпожи́ Ли́зы Джоко́ндо,) — картина Леонардо да Винчи, находящаяся в Лувре (Париж, Франция), одно из самых известных произведений живописи в мире, которое, как считается, является портретом Лизы Герардини, супруги торговца шёлком из Флоренции Франческо дель Джокондо, написанным около 1503—1505 года.

«Скоро уж четыре столетия, как Мона Лиза лишает здравого рассудка всех, кто, вдоволь насмотревшись, начинает толковать о ней». (Грюйе, конец XIX века). »

Джоконда
Париж. Лувр. 77х53. Дерево. 1506-1516

Ещё первые итальянские биографы Леонардо да Винчи писали о месте, которое занимала эта картина в творчестве художника. От работы над «Моной Лизой» Леонардо не уклонялся — как это было со многими другими заказами, а, наоборот, отдавался ей с какой-то страстью. Ей было посвящено все время, остававшееся у него от работы над «Битвой при Ангиари». Он потратил на него значительное время и, покидая Италию в зрелом возрасте, увёз с собой во Францию в числе некоторых других избранных картин. Да Винчи испытывал особенную привязанность к этому портрету, а также много размышлял во время процесса его создания, в «Трактате о живописи» и в тех заметках о технике живописи, которые не вошли в него, можно найти множество указаний, с несомненностью относящихся к «Джоконде».

«Студия Леонардо да Винчи» на гравюре 1845 года: Джоконду развлекают шуты и музыканты

Согласно Джорджио Вазари (1511—1574), автору биографий итальянских художников, который написал о Леонардо в 1550 году, 31 год спустя после его смерти, Мона Лиза (сокр. от мадонна Лиза) была женой флорентийца по имени Франческо дель Джокондо (итал. Francesco del Giocondo), на чей портрет Леонардо потратил 4 года, всё же оставив его неоконченным.

«Взялся Леонардо выполнить для Франческо дель Джокондо портрет моны Лизы, жены его, и, потрудившись над ним четыре года, оставил его недовершенным. Это произведение находится ныне у французского короля в Фонтенбло.
Это изображение всякому, кто хотел бы видеть, до какой степени искусство может подражать природе, дает возможность постичь это наилегчайшим образом, ибо в нем воспроизведены все мельчайшие подробности, какие только может передать тонкость живописи. Поэтому глаза имеют тот блеск и ту влажность, какие обычно видны у живого человека, а вокруг них переданы все те красноватые отсветы и волоски, которые поддаются изображению лишь при величайшей тонкости мастерства.
Ресницы, сделанные наподобие того как действительно растут на теле волосы, где гуще, а где реже, и расположенные соответственно порам кожи, не могли бы быть изображены с большей естественностью. Нос со своими прелестными отверстиями, розоватыми и нежными, кажется живым.
Рот, слегка приоткрытый, с краями, соединенными алостью губ, с телесностью своего вида, кажется не красками, а настоящей плотью. В углублении шеи при внимательном взгляде можно видеть биение пульса. И поистине можно сказать, что это произведение было написано так, что повергает в смятение и страх любого самонадеянного художника, кто бы он ни был.
Между прочим, Леонардо прибег к следующему приему: так как мона Лиза была очень красива, то во время писания портрета он держал людей, которые играли на лире или пели, и тут постоянно были шуты, поддерживавшие в ней веселость и удалявшие меланхолию, которую обычно сообщает живопись выполняемым портретам. У Леонардо же в этом произведении улыбка дана столь приятной, что кажется, будто бы созерцаешь скорее божественное, нежели человеческое существо; самый же портрет почитается произведением необычайным, ибо и сама жизнь не могла бы быть иной».

Возможно, этот рисунок из коллекции Хайд в Нью-Йорке сделан рукой Леонардо да Винчи и является предварительным эскизом портрета Моны Лизы. В этом случае любопытно, что сначала он намеревался вложить ей в руки пышную ветвь.

Скорее всего Вазари просто добавил историю о шутах для развлечения читателей. Текст Вазари также содержит точное описание бровей, отсутствующих на картине. Эта неточность могла возникнуть только в том случае, если автор описывал картину по памяти или же по рассказам других. Алексей Дживелегов пишет, что указание Вазари на то, что «работа над портретом продолжалась четыре года, явно преувеличено: Леонардо не пробыл во Флоренции столько времени после возвращения от Цезаря Борджа, а если бы он начал писать портрет до отъезда к Цезарю, Вазари, наверное, сказал бы, что он писал его пять лет». Также учёный пишет об ошибочном указании на неоконченность портрета — «портрет несомненно писался долго и был доведен до конца, что бы ни говорил Вазари, который в своей биографии Леонардо стилизовал его как художника, принципиально не умеющего окончить ни одну крупную работу. И не только был закончен, но является одной из наиболее тщательно отделанных вещей Леонардо».

Интересен факт, что в своём описании Вазари восхищается талантом Леонардо передавать физические феномены, а не сходством между моделью и картиной. Как кажется, именно эта «физическая» особенность шедевра оставила глубокое впечатление у посетителей ателье художника и дошла до Вазари почти пятьдесят лет спустя.

Картина была хорошо известна среди любителей искусства, хотя Леонардо уехал из Италии во Францию в 1516 году, взяв картину с собой. Согласно итальянским источникам она с тех пор находилась в коллекции французского короля Франциска I, однако остаётся неясным, когда и как она была им приобретена и почему Леонардо не вернул её заказчику.

Возможно, художник действительно не закончил картину во Флоренции, а взял её с собой при отъезде в 1516 году и наложил последний мазок в отсутствии свидетелей, которые могли бы рассказать об этом Вазари. В таком случае, он закончил её незадолго до своей смерти в 1519 году. (Во Франции он жил в Кло-Люсе неподалёку от королевского замка Амбуаз).

В 1517 году кардинал Луиджи д"Арагона посетил Леонардо в его французской мастерской.
Описание этого визита было сделано секретарём кардинала Антонио де Беатисом:
«10 октября 1517 года монсиньор и иже с ним посетили в одной из отдалённых частей Амбуаза мессира Леонардо да Винчи, флорентийца, седобородого старца, которому более семидесяти лет, — самого превосходного художника нашего времени. Он показал его превосходительству три картины: одну с изображением флорентийской дамы, писанную с натуры по просьбе брата Лоренцо Великолепного Джулиано Медичи, другую — святой Иоанн Креститель в молодости и третью — Святая Анна с Марией и младенцем Христом; все в высшей степени прекрасные.
От самого мастера, в связи с тем, что у него в то время была парализована правая рука, уже нельзя было ожидать новых хороших работ».
По мнению части исследователей, под «некой флорентийской дамой» подразумевается «Мона Лиза». Возможно, однако, что это был другой портрет, от которого не сохранилось ни свидетельств, ни копий, вследствие чего Джулиано Медичи не мог иметь никакого отношения к «Моне Лизе».

Картина XIX века кисти Энгра в преувеличенно-сентиментальной манере показывает горе короля Франциска у смертного ложа Леонардо да Винчи

Проблема идентификации модели

Вазари, родившийся в 1511 году, никак не мог увидеть Джоконду своими глазами и был вынужден сослаться на информацию, данную анонимным автором первой биографии Леонардо. Именно он и пишет о торговце шелками Франческо Джокондо, заказавшем у художника портрет своей третьей жены. Несмотря на слова этого анонимного современника, многие исследователи сомневались в возможности того, что «Мона Лиза» была написана во Флоренции (1500—1505), так как утончённая техника может указывать на более позднее создание картины. Приводился также довод, что в это время Леонардо был настолько занят работой над «Битвой Ангиари», что даже отказал маркизе мантуанской Изабелле д’Эсте принять её заказ (впрочем, с этой дамой его связывали очень сложные отношения).

Работа последователя Леонардо — изображение святой. Возможно, в её облике запечатлена Изабелла Арагонская, герцогиня Миланская, одна из кандидаток на роль Моны Лизы

Франческо дель Джокондо, видный флорентийский пополан, в тридцатипятилетнем возрасте в 1495 году женился в третий раз на молодой неаполитанке из знатной семьи Герардини — Лизе Герардини, полное имя Лиза ди Антонио Мариа ди Нольдо Герардини (15 июня 1479 — 15 июля 1542, или около 1551) . Хотя сведения о личности модели даёт Вазари, по поводу неё до сих пор долгое время оставалась неопределённость и высказывалось множество версий:

Согласно одной из выдвигавшихся версий, «Мона Лиза» — автопортрет художника

Тем не менее, версия о соответствии общепринятого названия картины личности модели в 2005 году, как считается, нашла окончательное подтверждение. Учёные из Гейдельбергского университета изучили заметки на полях фолианта, владельцем которого был флорентийский чиновник, личный знакомый художника Агостино Веспуччи. В записках на полях книги он сравнивает Леонардо со знаменитым древнегреческим живописцем Апеллесом и отмечает, что «сейчас да Винчи работает над тремя картинами, одна из которых — портрет Лизы Герардини». Таким образом, Мона Лиза действительно оказалась женой флорентийского торговца Франческо дель Джокондо — Лизой Герардини. Картина, как доказывают в этом случае учёные, была заказана Леонардо для нового дома молодой семьи и в ознаменование рождения их второго сына, названного Андреа.

Копия «Моны Лизы» из коллекции Уоллас (Балтимор) была сделана до того, как края оригинала были обрезаны, и позволяет разглядеть утраченные колонны

Копия «Моны Лизы» из коллекции Уоллас (Балтимор) была сделана до того, как края оригинала были обрезаны, и позволяет разглядеть утраченные колонны

На картине прямоугольного формата изображена женщина в тёмной одежде, обернувшаяся вполоборота. Она сидит в кресле, сложив руки вместе, оперев одну руку на его подлокотник, а другую положив сверху, повернувшись в кресле почти лицом к зрителю. Разделённые пробором, гладко и плоско лежащие волосы, видные сквозь накинутую на них прозрачную вуаль (по некоторым предположениям — атрибут вдовства), падают на плечи двумя негустыми, слегка волнистыми прядями. Зелёное платье в тонких сборках, с жёлтыми рукавами в складках, вырезано на белой невысокой груди. Голова слегка повёрнута.

Искусствовед Борис Виппер, описывая картину, указывает, что в лице Моны Лизы заметны следы моды кватроченто: у неё выбриты брови и волосы на верхушке лба.

Фрагмент «Моны Лизы» с остатками базы колонны

Нижний край картины обрезает вторую половину её тела, таким образом, портрет является практически поясным. Кресло, в котором сидит модель, стоит на балконе либо на лоджии, линия парапета которой видна позади её локтей. Как считается, раньше картина могла быть шире и вмещать две боковые колонны лоджии, от которых в данный момент остались две базы колонн, чьи фрагменты видны по краям парапета.

Лоджия выходит на пустынную дикую местность с извилистыми потоками и озером, окружённым снежными горами, которая простирается к высоко поднятой линии горизонта позади фигуры.

«Мона Лиза представлена сидящей в кресле на фоне пейзажа, и уже само сопоставление её сильно приближенной к зрителю фигуры с видимым издалека, как бы огромной горы, ландшафтом сообщает образу необыкновенное величие. Этому же впечатлению содействует контраст повышенной пластической осязательности фигуры и её плавного, обобщённого силуэта с уходящим в туманную даль, похожим на видение пейзажем с причудливыми скалами и вьющимися среди них водными протоками».

Композиция
Mona Lisa depth.jpg

Портрет Джоконды является одним из самых лучших образцов портретного жанра итальянского Высокого Ренессанса.

Борис Виппер пишет, что, несмотря на следы кватроченто, «своей одеждой с небольшим вырезом на груди и с рукавами в свободных складках, точно так же как прямой позой, лёгким поворотом тела и мягким жестом рук Мона Лиза всецело принадлежит эпохе классического стиля».

Михаил Алпатов указывает, что «Джоконда превосходно вписана в строго пропорциональный прямоугольник, полуфигура ее образует нечто целое, сложенные руки придают ее образу завершенность. Теперь, конечно, не могло быть и речи о причудливых завитках раннего „Благовещения“.
Впрочем, как ни смягчены все контуры, волнистая прядь волос Джоконды созвучна прозрачной вуали, а брошенная через плечо свесившаяся ткань находит себе отзвук в плавных извивах далекой дороги.
Во всем этом Леонардо проявляет свое умение творить согласно законам ритма и гармонии».
Современное состояние

Макросъёмка позволяет увидеть большое количество кракелюр (трещин) на поверхности картины.

«Мона Лиза» очень потемнела, что считается результатом свойственного её автору тяготения к экспериментам с красками, из-за которого фреска «Тайная вечеря» вообще практически погибла. Современники художника, тем не менее, успели выразить свои восторги не только по поводу композиции, рисунка и игры светотени — но и относительно колорита произведения. Предполагается, например, что изначально рукава её платья могли быть красными — как это видно из копии картины из Прадо.

Современное состояние картины достаточно плохое, из-за чего сотрудники Лувра объявили, что больше не будут отдавать её на выставки:
«На картине образовались трещины, а одна из них останавливается в считанных миллиметрах над головой Моны Лизы».

Анализ
Техника

Как отмечает Дживелегов, ко времени создания «Моны Лизы» мастерство Леонардо «уже вступило в фазу такой зрелости, когда поставлены и решены все формальные задачи композиционного и иного характера, когда Леонардо начинало казаться, что только последние, самые трудные задачи художественной техники заслуживают того, чтобы ими заняться. И когда он в лице моны Лизы нашёл модель, удовлетворявшую его запросам, он попробовал решить некоторые из самых высоких и трудных задач живописной техники, ещё им не решенных. Он хотел при помощи приемов, уже выработанных и испробованных им раньше, особенно при помощи своего знаменитого sfumato, дававшего и раньше необыкновенные эффекты, сделать больше, чем он делал раньше: создать живое лицо живого человека и так воспроизвести черты и выражение этого лица, чтобы ими был раскрыт до конца внутренний мир человека».

Пейзаж позади Моны Лизы

Борис Виппер задаётся вопросом, «какими средствами достигнута эта одухотворенность, эта не умирающая искра сознания в образе Моны Лизы, то следует назвать два главных средства.
Одно — это чудесное леонардовское сфумато. Недаром Леонардо любил говорить, что „моделировка — душа живописи“. Именно сфумато создает влажный взгляд Джоконды, легкую, как ветер, её улыбку, ни с чем не сравнимую ласкающую мягкость прикосновения рук».
Сфумато — это едва уловимая дымка, окутывающая лицо и фигуру, смягчающая контуры и тени. Леонардо рекомендовал для этой цели помещать между источником света и телами, как он выражается, «некий род тумана».

Ротенберг пишет, что «Леонардо сумел внести в свое создание ту степень обобщения, которая позволяет рассматривать его как образ ренессансного человека в целом. Эта высокая мера обобщения сказывается во всех элементах изобразительного языка картины, в её отдельных мотивах — в том, как легкая, прозрачная вуаль, охватывая голову и плечи Моны Лизы, объединяет тщательно выписанные пряди волос и мелкие складки платья в общий плавный контур; она ощутима в ни с чем не сравнимой по нежной мягкости моделировке лица (на котором по моде того времени удалены брови) и прекрасных холеных рук».

Алпатов добавляет, что «в мягко тающей дымке, окутывающей лицо и фигуру, Леонардо удалось дать почувствовать беспредельную изменчивость человеческой мимики. Хотя глаза Джоконды внимательно и спокойно смотрят на зрителя, благодаря затененности её глазных впадин можно подумать, будто они чуть хмурятся; губы её сжаты, но около их уголков намечаются едва уловимые тени, которые заставляют поверить, что каждую минуту они разомкнутся, улыбнутся, заговорят.
Самый контраст между пристальным взглядом и полуулыбкой на устах дает понятие о противоречивости её переживаний. (…) Леонардо трудился над ней несколько лет, добиваясь того, чтобы в картине не осталось ни одного резкого мазка, ни одного угловатого контура; и хотя края предметов в ней ясно ощутимы, все они растворяются в тончайших переходах от полутеней к полусветам»

Пейзаж

Искусствоведы подчёркивают органичность, с которой художник соединил портретную характеристику личности с пейзажем, полным особенного настроения, и насколько сильно это увеличило достоинства портрета.

Ранняя копия «Моны Лизы» из Прадо демонстрирует, как много теряет портретный образ, помещённый на тёмный нейтральный фон

Виппер считает пейзаж вторым средством, которое создаёт одухотворённость картины: «Второе средство — это отношение между фигурой и фоном. Фантастический, скалистый, словно увиденный сквозь морскую воду пейзаж на портрете Моны Лизы обладает какой-то другой реальностью, чем сама ее фигура. У Моны Лизы — реальность жизни, у пейзажа — реальность сна. Благодаря этому контрасту Мона Лиза кажется такой невероятно близкой и ощутимой, а пейзаж мы воспринимаем как излучение ее собственной мечты».

Внешний облик и душевный строй конкретной личности переданы им с небывалой синтетичностью.
Этому имперсональному психологизму отвечает космическая отвлеченность пейзажа, почти полностью лишенного каких-либо признаков человеческого присутствия. В дымчатой светотени не только смягчаются все очертания фигуры и пейзажа и все цветовые тона. В почти неуловимых глазом тончайших переходах от света к тени, в вибрации леонардовского „сфумато“ до предела смягчается, тает и готова исчезнуть всякая определенность индивидуальности и её психологического состояния. (…) „Джоконда“ — не портрет. Это — зримый символ самой жизни человека и природы, соединенных в одно целое и представленных отвлеченно от своей индивидуально-конкретной формы. Но за еле заметным движением, которое, как лёгкая рябь, пробегает по неподвижной поверхности этого гармонического мира, угадывается все богатство возможностей физического и духовного бытия».

«Мона Лиза» выдержана в золотисто-коричневых и рыжеватых тонах первого плана и изумрудно-зелёных тонах дали. «Прозрачные, как стекло, краски образуют сплав, словно созданный не рукой человека, но той внутренней силой материи, которая из раствора рождает совершенные по форме кристаллы».
Как многие работы Леонардо, это произведение потемнело от времени, и его цветовые соотношения несколько изменились, однако и сейчас отчётливо воспринимаются продуманные сопоставления в тонах карнации и одежды и их общий контраст с голубовато-зелёным, «подводным» тоном пейзажа.

Историки искусства отмечают, что портрет Моны Лизы стал решающим шагом на пути развития ренессансного портретного искусства. Ротенбер пишет: «хотя живописцы кватроченто оставили ряд значительных произведений этого жанра, все же их достижения в портрете были, так сказать, непропорциональны достижениям в основных живописных жанрах — в композициях на религиозную и мифологическую тематику. Неравноправие портретного жанра сказывалось уже в самой „иконографии“ портретных изображений.
«Донна Нуда» (то есть «Обнажённая донна»). Неизвестный художник, конец XVI века, Эрмитаж

В своей новаторской работе Леонардо перенёс главный центр тяжести на лицо портретированной. Одновременно использовал и руки, как мощное средство психологической характеристики. Сделав портрет поколенным по формату, художник получил возможность демонстрировать более широкий диапазон изобразительных приёмов. А самым важным в образном строе портрета является — это подчинение всех частностей руководящей идее. «Голова и руки — вот несомненный центр картины, которому принесены в жертву остальные её элементы. Сказочный ландшафт как бы просвечивает сквозь морские воды, настолько он кажется далеким и неосязаемым. Его главная цель — не отвлечь внимания зрителя от лица. И эту же роль призвано выполнить одеяние, распадающееся на мельчайшие складочки. Леонардо сознательно избегает тяжелых драпировок, которые могли бы затемнить выразительность рук и лица. Таким образом, он заставляет выступать последние с особой силой, тем большей, чем скромнее и нейтральнее ландшафт и одеяние, уподобляющиеся тихому, едва заметному аккомпанементу».

Ученики и последователи Леонардо создавали многочисленные реплики с «Моны Лизы». Некоторые из них (из коллекции Вернон, США; из коллекции Уолтер, Балтимор, США; а также некоторое время Айслвортская «Мона Лиза», Швейцария) считаются своими владельцами аутентичными, а картина в Лувре — копией. Также существует иконография «обнажённая Мона Лиза», представленная несколькими вариантами («Прекрасная Габриэль», «Монна Ванна», эрмитажная «Донна Нуда»), выполненными, видимо, ещё учениками самого художника. Большое их количество вызвало на свет недоказуемую версию, что существовал вариант обнажённой Моны Лизы, написанный самим мастером.

Репутация картины

«Мона Лиза» за пуленепробиваемым стеклом в Лувре и толпящиеся рядом посетители музея

Несмотря на то, что «Мона Лиза» была высоко оценена современниками художника, в дальнейшем её репутация потускнела. О картине не вспоминали особенно до середины XIX века, когда художники, близкие к символистскому движению, начали восхвалять её, ассоциируя со своими идеями относительно женской загадочности. Критик Уолтер Патер в своём эссе 1867 года о да Винчи выразил своё мнение, описав фигуру на картине, как своего рода мифическое воплощение вечной женственности, которое «старше скал, меж которых оно сидит» и которое «умирало множество раз и изучило тайны загробного мира».

Дальнейший взлёт славы картины связан с её таинственным исчезновением в начале XX века и счастливым возвращением в музей несколько лет спустя (см. ниже, раздел Кража), благодаря чему она не сходила со страниц газет.

Современник её приключения критик Абрам Эфрос писал: «…музейный сторож, не отходящий ныне ни на шаг от картины, со времени её возвращения в Лувр после похищения 1911 г., сторожит не портрет супруги Франческе дель Джокондо, а изображение какого то полу-человеческого, полу-змеиного существа, не то улыбающегося, не то хмурого, господствующего над охладевшим, голым, утесистым пространством, раскинувшимся за спиной».

«Мона Лиза» на сегодняшний день является одной из самых знаменитых картин западноевропейского искусства. Её громкая репутация связана не только с её высокими художественными достоинствами, но и с атмосферой загадочности, окружающей это произведение.

Все знают, какую неразрешимую загадку вот уже скоро четыреста лет загадывает Мона Лиза поклонникам, толпящимся перед образом ее. Никогда дотоле художник не выразил сущность женственности (я привожу строки, записанные утонченным писателем, скрывающимся за псевдонимом Пьера Корле): «Нежность и скотство, стыдливость и затаенное сладострастие, великая тайна сердца, обуздывающего себя, ума рассуждающего, личность, замкнутая в себе, оставляющая другим созерцать лишь блеск её». (Эжен Мюнтц).

Одна из загадок связана с глубокой привязанностью, которую автор испытывал к этому произведению. Объяснения предлагали разные, например, романтическое: Леонардо влюбился в мону Лизу и умышленно затягивал работу, чтобы подольше оставаться с ней, а она дразнила его своей загадочной улыбкой и доводила до величайших творческих экстазов. Эта версия считается просто домыслом. Дживелегов считает, что эта привязанность связана с тем, он нашёл в ней точку приложения многих из своих творческих исканий.

Улыбка Джоконды

Леонардо да Винчи. «Иоанн Креститель». 1513—1516, Лувр. Эта картина тоже имеет свою загадку: почему Иоанн Креститель улыбается и указывает вверх?

Леонардо да Винчи. «Святая Анна с Мадонной и младенцем Христом» (фрагмент), ок. 1510, Лувр.

Улыбка Моны Лизы является одной из самых знаменитых загадок картины. Эта лёгкая блуждающая улыбка встречается во многих произведениях как самого мастера, так и у леонардесков, но именно в «Моне Лизе» она достигла своего совершенства.

« Особенно завораживает зрителя демоническая обворожительность этой улыбки. Сотни поэтов и писателей писали об этой женщине, которая кажется то обольстительно улыбающейся, то застывшей, холодно и бездушно смотрящей в пространство, и никто не разгадал ее улыбку, никто не истолковал ее мысли. Все, даже пейзаж, таинственны, подобно сновидению, трепетны, как предгрозовое марево чувственности (Мутер). »

Гращенков пишет: «Бесконечное многообразие человеческих чувств и желаний, противоборствующих страстей и помыслов, сглаженных и слитых воедино, отзывается в гармонически бесстрастном облике Джоконды лишь неопределённостью её улыбки, едва зарождающейся и пропадающей.
Это ничего не означающее мимолетное движение уголков её рта, словно отдалённое, слившееся в один звук эхо, доносит до нас из беспредельной дали красочную полифонию духовной жизни человека».

Искусствовед Ротенберг считает, что «немного найдется во всем мировом искусстве портретов, равных „Моне Лизе“ по силе выражения человеческой личности, воплощенной в единстве характера и интеллекта. Именно необычайная интеллектуальная заряженность леонардовского портрета отличает его от портретных образов кватроченто. Эта его особенность воспринимается тем острее, что она относится к женскому портрету, в котором характер модели прежде раскрывался в совершенно иной, преимущественно лирической образной тональности.
Исходящее от „Моны Лизы“ ощущение силы — это органическое сочетание внутренней собранности и чувства личной свободы, духовная гармония человека, опирающегося на его сознание собственной значительности. И сама улыбка её отнюдь не выражает превосходства или пренебрежения; она воспринимается как результат спокойной уверенности в себе и полноты самообладания».

Борис Виппер указывает, что упомянутое выше отсутствие бровей и выбритый лоб, быть может, невольно усиливает странную загадочность в выражении её лица. Далее он пишет о силе воздействия картины: «Если мы спросим себя, в чем заключается великая притягательная сила „Моны Лизы“, её действительно ни с чем не сравнимое гипнотическое воздействие, то ответ может быть только один — в её одухотворенности. В улыбку „Джоконды“ вкладывали самые хитроумные и самые противоположные интерпретации. В ней хотели читать гордость и нежность, чувственность и кокетство, жестокость и скромность.
Ошибка заключалась, во-первых, в том, что искали во что бы то ни стало индивидуальных, субъективных душевных свойств в образе Моны Лизы, тогда как несомненно, что Леонардо добивался именно типической одухотворенности.
Во-вторых, — и это, пожалуй, ещё важнее — одухотворенности Моны Лизы пытались приписать эмоциональное содержание, между тем как на самом деле она имеет интеллектуальные корни.
Чудо Моны Лизы заключается именно в том, что она мыслит; что, находясь перед пожелтевшей, потрескавшейся доской, мы непреоборимо ощущаем присутствие существа, наделенного разумом, существа, с которым можно говорить и от которого можно ждать ответа».

Лазарев анализировал её как учёный-искусствовед: «Эта улыбка является не столько индивидуальной чертой Моны Лизы, сколько типической формулой психологического оживления, формулой, проходящей красной нитью через все юношеские образы Леонардо, формулой, которая позднее превратилась, в руках его учеников и последователей, в традиционный штамп. Подобно пропорциям леонардовских фигур, она построена на тончайших математических измерениях, на строгом учете выразительных ценностей отдельных частей лица. И при всем том, эта улыбка абсолютно естественна, и в этом именно сила её очарования. Она отнимает у лица все жесткое, напряженное, застылое, она превращает его в зеркало смутных, неопределенных душевных переживаний, в своей неуловимой легкости она может быть сравнена лишь с пробегающей по воде зыбью».

Mona Lisa detail mouth.jpg

Её анализ привлекал внимание не только искусствоведов, но и психологов. Зигмунд Фрейд пишет:
«Кто представляет картины Леонардо, у того всплывает воспоминание о странной, пленительной и загадочной улыбке, затаившейся на губах его женских образов. Улыбка, застывшая на вытянутых, трепетных губах, стала характерной для него и чаще всего называется „леонардовской“.
В своеобразно прекрасном облике флорентийки Моны Лизы дель Джоконды она сильнее всего захватывает и повергает в замешательство зрителя. Эта улыбка требовала одного толкования, а нашла самые разнообразные, из которых ни одно не удовлетворяет. (…)
Догадка, что в улыбке Моны Лизы соединились два различных элемента, рождалась у многих критиков. Поэтому в выражении лица прекрасной флорентийки они усматривали самое совершенное изображение антагонизма, управляющего любовной жизнью женщины, сдержанности и обольщения, жертвенной нежности и безоглядно-требовательной чувственности, поглощающей мужчину как нечто постороннее. (…) Леонардо в лице Моны Лизы удалось воспроизвести двоякий смысл её улыбки, обещание безграничной нежности и зловещей угрозы».

Копия XVI века, находящаяся в Эрмитаже, Санкт-Петербург

Особенно завораживает зрителя демоническая обворожительность этой улыбки. Сотни поэтов и писателей писали об этой женщине, которая кажется то обольстительно улыбающейся, то застывшей, холодно и бездушно смотрящей в пространство, и никто не разгадал ее улыбку, никто не истолковал ее мысли. Все, даже пейзаж, таинственны, подобно сновидению, трепетны, как предгрозовое марево чувственности (Мутер).

Философ А. Ф. Лосев пишет о ней резко негативно:
…"Мона Лиза" с её «бесовской улыбочкой». «Ведь стоит только всмотреться в глаза Джоконды, как можно без труда заметить, что она, собственно говоря, совсем не улыбается. Это не улыбка, но хищная физиономия с холодными глазами и отчетливым знанием беспомощности той жертвы, которой Джоконда хочет овладеть и в которой кроме слабости она рассчитывает еще на бессилие перед овладевшим ею скверным чувством».

Открыватель термина микровыражение психолог Пол Экман (прототип доктора Кэла Лайтмана из телесериала «Обмани меня») пишет о выражении лица Джоконды, анализируя его с точки зрения своих знаний о человеческой мимике: «два других вида [улыбок] сочетают искреннюю улыбку с характерным выражением глаз. Флиртующая улыбка, хотя при этом соблазнитель и отводит глаза в сторону от объекта своего интереса, чтобы затем вновь бросить на него лукавый взгляд, который опять же мгновенно отводится, едва лишь будет замечен. Необычность впечатления от знаменитой Моны Лизы отчасти и заключается в том, что Леонардо ловит свою натуру именно в момент этого игривого движения; повернув голову в одну сторону, она смотрит в другую — на предмет своего интереса. В жизни это выражение лица мимолетно — взгляд украдкой длится не более мгновения»

История картины в Новое время

Ко дню своей смерти в 1525 году ассистент (и, возможно, возлюбленный) Леонардо по имени Салаи владел, судя по упоминаниям в его личных бумагах, портретом женщины под именем «Джоконда» (quadro de una dona aretata), которая была завещана ему учителем. Салаи оставил картину своим сёстрам, жившим в Милане. Остаётся загадкой, как в таком случае портрет попал из Милана обратно во Францию. Также неизвестно, кто и когда именно обрезал края картины с колоннами, которые, по мнению большинства исследователей, основывающемуся на сравнении с другими портретами, существовали в первоначальном варианте. В отличие от другой обрезанной работы Леонардо — «Портрета Джиневры Бенчи», нижняя часть которого была обрезана, так как пострадала от воды или огня, в данном случае причины были, скорее всего, композиционного характера. Существует версия, что это сделал сам Леонардо да Винчи.

Толпа в Лувре у картины, наши дни

Король Франциск I, как считается, купил картину у наследников Салаи (за 4 000 экю) и хранил в своём замке Фонтенбло, где она оставалась до времён Людовика XIV. Последний перевёз её в Версальский дворец, а после Французской революции она оказалась в Лувре. Наполеон повесил портрет в своей спальне дворца Тюильри, затем она вернулась обратно в музей.

Во время Второй мировой войны картина была в целях безопасности перевезена из Лувра в замок Амбуаз, потом в аббатство Лок-Дьё, и наконец в музей Энгра в Монатабане, откуда после победы благополучно вернулась на место.

В двадцатом столетии картина почти не покидала Лувр, побывав в 1963 в США и в 1974 в Японии. По пути из Японии во Францию картина была выставлена в музее им. А. С. Пушкина в Москве. Поездки только закрепили успех и славу картины.

1911 год. Пустая стена, где висела «Мона Лиза»

Мона Лиза ещё долго была бы известна только тонким знатокам изобразительного искусства, если бы не её исключительная история, которая обеспечила ей всемирную известность.

Винченцо Перуджиа. Лист из уголовного дела.

21 августа 1911 года картина была похищена работником Лувра, итальянским мастером по зеркалам Винченцо Перуджиа (итал. Vincenzo Peruggia). Цель этого похищения не выяснена однозначно. Возможно, Перуджа хотел возвратить «Джоконду» на историческую родину, считая, что французы «похитили» её и забывая, что Леонардо сам привёз картину во Францию. Поиски полиции были безуспешными. Поэт Гийом Аполлинер был арестован по подозрению в совершении преступления и позже освобождён. Пабло Пикассо также находился под подозрением. Картину нашли только спустя два года

Задания уровня A

А1. Какая наука изучает особенности внешнего строения живых организмов?
3) морфология

А2. Немецкие учёные М. Шлейден и Т. Шванн являются основоположниками теории
3) клеточной

A3. Запасным углеводом в растительной клетке является
1) крахмал

А4. Сколько хромосом в соматических клетках плодовой мухи-дрозофилы, если в её половых клетках содержится 4 хромосомы?
3)8

А5. Защищаясь от вирусов, клетки вырабатывают белок
2) интерферон

А6. Размножение инфузории туфельки может происходить в результате
3) деления и конъюгации

А7. Особей, образующих несколько видов гамет и дающих расщепление признаков в потомстве, называют
3) гетерозиготными

А8. Какой из приведённых ниже вариантов дигибридного скрещивания между мышами предоставляет наилучшую возможность получить в одном помёте мышь с генотипом ААВЬ?
2) АаВЬ х ААВЬ

А9. Изменчивость, при которой изменяется только фенотип,
1) модификационная

А10. Споры на пластинках плодового тела образуются у
3) рыжика

A11. Корневые клубни образуются
3) из боковых и придаточных корней

А13. На рисунке схематически изображена система органов белой планарии
3) нервная

А14. У птиц, в отличие от млекопитающих,
4) размножение яйцами

А15. Вид ткани, для которой характерно минимальное содержание межклеточного вещества,
1) эпителиальная

А16. Надкостница не может обеспечить
1) рост кости в длину

А17. Эритроциты вырабатываются в
1) красном костном мозге

А18. Пучки длинных отростков нейронов, покрытые соединительнотканной оболочкой и расположенные вне центральной нервной системы, образуют
1) нервы

А19. Какой витамин следует включить в рацион ребёнка, чтобы он не заболел рахитом?
4) D

А20. К какому критерию вида следует отнести различия в строении соцветий у колокольчика раскидистого и колокольчика сборного?
3) морфологическому

А21. Примером внутривидовой борьбы за существование служат отношения между
4) волками двух разных стай

А22. Утрата конечностей и одинаковая вытянутая форма тела у червяг, безногих ящериц и змей является результатом
2)параллелизма в эволюции

А23. К социальным факторам антропогенеза относят
1) появление речи

А24. Взаимоотношения организмов разных видов, нуждающихся в одинаковых пищевых ресурсах, укладываются в схему
3) конкуренция

А25. В биогеоценозе луга к продуцентам относят
1) травы

А26. Способностью к саморегуляции обладает оболочка Земли
1) биосфера

А27. Плохо растворимые в воде соединения не встречаются среди
4) нуклеотидов

А28. Свободный кислород (02) образуется в процессе фотосинтеза в результате расщепления
2)Н20

А29. Какая фаза деления клетки изображена на рисунке?
3) анафаза

АЗ0. При скрещивании двух гетерозиготных растений гороха с жёлтыми и гладкими семенами АаВЪ соотношение расщепления признаков по фенотипу у гибридов первого поколения составит
1) 9: 3: 3: 1

А31. Из методов, применяемых в селекции, не сопровождается изменением генетических свойств организмов
4) клонирование

А32. Зубы растут в течение всей жизни у представителей млекопитающих животных отряда
4) Грызуны

АЗЗ. Объём воздуха, который можно вдохнуть после спокойного выдоха, называют
2) дыхательным объёмом

А34. Ответная реакция собаки на команду хозяина - это пример рефлекса
1) условного

А35. Среди перечисленных примеров ароморфозом является
3) появление цветка и покрытосеменных растений

А36. Функции «главного абиотического редуцента» в наземных экосистемах выполняют
1) бактерии

Задания уровня В

Выберите три правильных ответа из шести предложенных.

В1. В растительной клетке двойную мембрану имеют
1) ядро
2) митохондрии
5) хлоропласты

В2. Для осуществления газообмена у всех животных необходимо наличие
3) процесса диффузии
4) тонких и влажных поверхностей
5) воды или воздуха, содержащих кислород

ВЗ. Из названных признаков, возникших в ходе эволюции, примерами идиоадаптаций являются
2) волосяной покров млекопитающих
3) наружный скелет беспозвоночных
5) роговой клюв у птиц

Установите соответствие между содержанием первого и второго столбцов.

В4. Установите соответствие между признаком организма и царством, для которого он характерен.
ЦАРСТВА
1) Грибы
2) Растения
ПРИЗНАК
A) наличие в клетках пластид Б) наличие в клетках крупных вакуолей
B) запасное вещество - крахмал Г) запасное вещество - гликоген Д) преимущественно гетеротрофы Е) преимущественно автотрофы

В5. Установите соответствие между сосудом кровеносной системы и кругом кровообращения, к которому он принадлежит.
СОСУД КРОВЕНОСНОЙ СИСТЕМЫ
A) аорта
Б) лёгочная вена
B) лёгочная артерия Г) верхняя полая вена Д) нижняя полая вена Е) сонные артерии Ж) печёночная вена
КРУГИ
КРОВООБРАЩЕНИЯ
1) большой круг
2) малый круг

В6. Установите соответствие между процессом и видом обмена веществ, к которому он принадлежит.
ПРОЦЕСС
A) образование аминокислот в пищеварительном тракте
Б) синтез белков на рибосомах
B) синтез жиров
Г) образование гликогена
Д) образование глюкозы из гликогена печени
Е) синтез АТФ
ОБМЕН ВЕЩЕСТВ
1) энергетический 2) пластический

Установите правильную последовательность биологических процессов, явлений, практических действий.

В7. Установите последовательность возникновения нарушений в функционировании растительного организма, вызванную регулярным поливом водой с повышенным содержанием в ней минеральных солей, например хлорида калия.
А) пассивный транспорт солей с током воды в клетки растения
Б) плазмолиз в клетках корня
В) общий дефицит воды в условиях интенсивной транспирации
Г) в почве создаётся резко отрицательный осмотический потенциал
Д) гибель растения
Е) повреждение плазмалеммы клеток корня

В8. Установите последовательность процессов, вызывающих смену экосистем.
A) уменьшение ресурсов, необходимых для существования исходных видов
Б) заселение среды обитания особями других видов
B) сокращение численности исходных видов
Г) изменение среды обитания в результате действия экологических факторов
Д) формирование новой экосистемы

Задания уровня С

Дайте краткий свободный ответ.

С1. С какой целью при пересадке рассады проводят пикировку (прищипывают кончик корня)?
1) При пикировке удаляется кончик главного корня, что приводит к росту боковых корней.
2) В результате увеличивается площадь питания растений.

Дайте полный развёрнутый ответ.

Неправильные ответы:
2) Среди грибов встречаются одноклеточные организмы, например, дрожжи.
3) Среди грибов отсутствуют автотрофы.
4) Клеточные стенки грибов состоят из хитина.

СЗ. Почему эвглену зелёную одни учёные относят к растениям, а другие - к животным? Укажите не менее трёх причин.
Ответ:
1) как растения, эвглена зеленая содержит в клетках хлорофилл (осуществляет процесс фотосинтеза)=>питание фотоавтотрофное;
2) как все животные, способна к фагоцитозу=> питание гетеротрофное;
3)как животные, способна к передвижению.

С4. Во многих населённых пунктах принято собирать в кучу и сжигать на месте опавшие листья. Дайте экологическую оценку этим действиям.
При сжигании растительности в воздух выделяется дым, в состав которого входят пыль, угарный газ, окиси азота и ряд соединений канцерогенного типа, также диоксины - одни из самых ядовитых веществ для человека. Чтобы опалая листва не подкисляла почву, лучше утилизировать опавшие листья с пользой для окружающей среды, а именно, компостировать.

С5. При росте клеток происходит увеличение их объёма, однако установлено, что количество цитоплазмы при этом остаётся неизменным. Дайте объяснение этому явлению.
При росте клеток количество цитоплазмы в основном увеличивается на первых стадиях, далее происходит дифференциация и рост клеточных органелл, клетки становятся специализированными и приобретают необходимую форму, размеры в соответствии с выполняемыми функциями.

С6. Отсутствие малых коренных зубов у человека наследуется как доминантный аутосомный признак. Определите возможные генотипы и фенотипы родителей и потомства, если один из супругов имеет малые коренные зубы, а у другого они отсутствуют и он гетерозиготен по этому признаку. Какова вероятность рождения детей с этой аномалией?
Ответ:
1) Генотипы и фенотипы Р: аа - с малыми коренными зубами, Аа - без малых коренных зубов;
2) генотипы и фенотипы потомства: Аа - без малых коренных зубов, аа - с малыми коренными зубами;
3) вероятность рождения детей без малых коренных зубов - 50%.

Другой механизм защиты против вирусов - молекулярный. Ответственны за противовирусную защиту молекулы интерферонов. Они способны “интерферировать”, то есть противодействовать процессам биосинтеза вирусных частиц в клетке хозяина. Интерферон синтезируется клеткой-продуцентом в ответ на заражение вирусом и соединяется с соответствующими рецепторами на поверхности зараженных клеток. Взаимодействие цитокина (в данном случае интерферона) со своим специфическим рецептором влечет за собой передачу внутриклеточного сигнала к ядру клетки. В клетке включаются гены, ответственные за синтез белков и ферментов, препятствующих самовоспроизведению вируса. Таким образом, интерферон блокирует биосинтез вирусных частиц в зараженной клетке. Это позволяет использовать препараты интерферона в качестве лечебных при вирусных инфекциях.

Клеточные и молекулярные механизмы при защите от вирусов, как и при защите от бактерий, работают согласованно, приходя на помощь друг другу. Молекулы интерферонов, кроме антивирусного действия, оказывают влияние на функции защитных клеток. Гамма-интерферон, как уже было сказано выше, является активатором макрофагов.

Активированные гамма-интерфероном макрофаги могут пополнить армию клеток-киллеров, но только при участии специфических противовирусных антител, которые образуют своеобразные мостики между макрофагами и зараженными клетками-мишенями. Специфический ответ на вирусные антигены неизбежно вовлекает популяцию Т-хелперов, которые в ответ на активацию начинают усиленно синтезировать и секретировать интерлейкин-2. А этот цитокин известен своей способностью резко активизировать клетки-киллеры.

Иммунодефицитные состояния

Наиболее распространенной формой патологии иммунной системы является иммунологическая недостаточность, или, согласно международной терминологии, иммунодефицитные состояния (ИДС). В основе ИДС лежат нарушения генетического кода (или других структур). На уровне организма это означает неспособность иммунной системы осуществлять то или иное звено иммунного ответа. Такие нарушения могут быть либо первичными (врожденными), либо вторичными (приобретенными). Причины возникновения их в обоих случаях одни и те же - влияние вредных факторов окружающей среды. Дефекты иммунного ответа могут обнаруживаться как на уровне стволовых клеток, Т- и В-лимфоцитов, макрофагов, системы комплемента, так и на уровне ферментов, участвующих в созревании иммуноцитов или в лизисе чужеродных клеток. СПИД - общеизвестный пример приобретенной формы ИДС. В этом случае избирательно поражаются Т-хелперы и частично макрофаги после проникновения в них вирусов (ВИЧ).

Другая форма патологии иммунитета, которая может возникать после воздействия неблагоприятных факторов среды - это аутоиммунные заболевания. Основную роль здесь играют Т-супрессоры. Супрессорные Т-клетки принимают участие в поддержании неотвечаемости (иммунологической толерантности) к антигенам собственных тканей. В норме они блокируют действие аутоагрессивных Т- и В-клеток. Но в тех случаях, когда этот заслон нарушается, развиваются аутоиммунные (саморазрушительные) конфликты. Широко известно заболевание такого рода - тиреоидит (аутоиммунное заболевание щитовидной железы).

Третья форма иммунной патологии, возникающая в подобных случаях, - нарушение противоопухолевого иммунитета.

Выводы

Организм человека обладает иммунитетом - рядом защитных реакций, направленных против инфекционных агентов. Первые (немедленные) защитные реакции - это реакции неспецифические, то есть они универсально направлены против любых чужеродных клеток, вирусов, крупных молекул. Вторые защитные реакции - уже высокоспецифические, на запуск этой системы необходимо некоторое время.

Системы неспецифического (врожденного, естественного) и специфического (приобретенного) иммунитета должны рассматриваться как две стадии единого процесса защиты организма. Система врожденного иммунитета действует на основе воспаления и фагоцитоза. Система приобретенного иммунитета основана на специфических функциях лимфоцитов.

Макрофаги и лимфоциты - основные клетки иммунной системы.

Тимус - это центральный орган иммунитета, где закладываются основы клеточного типа реагирования. Отбор клеток по способности распознавать свои собственные антигены является определяющим условием дальнейшего внутритимусного развития Т-лимфоцитов.

Функции антигена (“чужой” молекулы)- найти соответствующий ему лимфоцит, вызвать его деление и дифференцировку в клетку, секретирующую антитела.

На внедрение и размножение микробов организм отвечает мобилизацией защитных клеток и продукцией защитных молекул - иммунным ответом. Чтобы иммунный ответ состоялся, оказался достаточно эффективным, выполнил свои защитные функции и был своевременно выключен за ненадобностью, необходимы четкие межклеточные взаимодействия, которые обеспечиваются цитокинами. Цитокины являются своеобразным межклеточным языком.

Одной из первых линий защиты организма от бактериальной и вирусной инфекции служат воспалительные процессы. Пока не сформировался полноценный иммунный ответ, они быстро индуцируются для ограничения распространения инфекции в первые часы и дни после заражения. Ключевую роль

в индукции воспалительных реакций играют такие цитокины (молекулярные сигналы), как фактор некроза опухолей (ФНО) и интерлейкин-1 (ИЛ-1).

Фактор некроза опухолей и гамма-интерферон относятся к важнейшим регуляторам иммунной системы организма. Проявляют они также и прямую антивирусную активность.

Другие неспецифические (врожденные) защитные реакции осуществляет система комплемента. Это многокомпонентная система белков (более 20), которые циркулируют в кровяном русле. Основные функции комплемента - распознавание, разрушение и удаление из организма генетически чужеродного материала. Кроме того, комплемент играет важную роль и в регуляции воспалительных и иммунологических реакций организма.

Специфический иммунитет принято делить на гуморальный (ответственны В-лимфоциты) и клеточный (ответственны Т-лимфоциты). Ни В-клетки, ни Т-киллеры не в состоянии развить максимально эффективную реакцию самостоятельно. Именно через процесс взаимодействия различных типов иммуннокомпетентных клеток формируется наиболее выраженный иммунный ответ.

Характерные черты специфического иммунитета - умение отличать “свое” от “не своего”, иммунологическая память, специфичность запоминания, толерантность при внутриутробном введении антигена.

Среди защитных клеток и молекул немало дублеров, способных выполнять одни и те же функции. Клетки, связанные друг с другом посредством цитокинов, образуют своеобразную сеть. Она служит для многоканальной передачи сигналов от клетки к клетке, обеспечивает восприятие этих сигналов и соответствующий ответ. Информация от клетки к клетке передается в виде молекул цитокина.

Система комплемента резко усиливает действие антител. Комплемент сообщает комплексу антител - антитело токсичность, средство к фагоцитирующим клеткам и способность вызывать воспаление.

Система программируемой клеточной смерти - существенный фактор иммунитета, поскольку гибель зараженной клетки может предотвратить распространение инфекции по организму.

Заключение

Мы рассмотрели сложную и индивидуально целесообразно устроенную систему защитных реакций организма. Одной из важнейших проблем современной биологии является вопрос о том, как и из чего она могла возникнуть в процессе эволюции. Подходы к этой проблеме лишь только намечаются.

Ясно, что защиту организма от внешней и внутренней биологической агрессии иммунная система обеспечивает путем двух основных механизмов - распознавания и разрушения чужеродных молекул и клеток. Это достигается благодаря слаженной работе иммуноцитов различного функционального предназначения. Основным молекулярным инструментом для реализации иммунного ответа служат антитела и поверхностные рецепторы. Причем те и другие могут выполнять как функцию распознавания, так и функцию разрушения чужеродных тел. Межклеточная связь между иммуноцитами выполняют интерлейкины, интерфероны и другие медиаторы. Нарушение этих механизмов приводит к различным формам иммунопатологии, опасной для здоровья и жизни.

Список литературы

1. Абелев Г.И. Основы иммунитета. - “Соросовский Образовательный журнал”, 1996г., №5, С. 4-10.

2. Абелев Г.И. Воспаления. - “Соросовский Образовательный журнал”, 1996г., №10,

3. Агол В.И. Генетически запрограммированная смерть клеток. - “Соросовский Образовательный журнал”, 1996г, №10, С. 28-32.

4. Блинкин С.А. В мире незримого. - М., “Знание”, 1976г., С.112.

Глава 4.2. Механизмы противовирусной защиты

К наиболее изученным механизмам защиты клеток млекопитающих и птиц от вирусной инфекции относят выработку клетками в большем или меньшем объеме специфических низкомолекулярных гликопротеинов, получивших название интерфероны (от лат. inter  «взаимно, между собой» и ferio  «ударяю, поражаю»).

Интерферон (IFN) был открыт в 1957 г. А. Айзексом и Ш. Линденманном при изучении явления интерференции вирусов. Вирус гриппа при размножении в культуре куриной эмбриональной ткани способствовал синтезу фактора, выделяемого клетками в питательную среду и делающего новые куски добавляемой в среду той же ткани невосприимчивыми к вирусной инфекции. По мнению авторов, выработка этого фактора и лежала в основе явления интерференции (антагонизма) вирусов, поэтому они назвали открытый ими фактор интерфероном, а потом показали, что это видоспецифичный белок, который образуется почти во всех ядерных клетках.

При заражении клетки вирусначинает размножаться. Клетка-хозяин в ответ на вирусную инфекцию начинает продуцировать интерферон, выходящий из клетки и вступающий в контакт с соседними клетками (рис. 4.10). Взаимодействие с интерфероном делает эти клетки невосприимчивыми к вирусу путем подавления синтеза вирусных белков и в некоторых случаях сборки и выхода вирусных частиц. Интерферон, не обладая прямым противовирусным действием, вызывает такие изменения в клетке, которые препятствуют размножению вируса. Конечным результатом действия интерферона

Рис. 4.10. Схема воздействия интерферонов (IFN, , ) на клетку и спектр их биологических активностей: противовирусная защита, стимуляция иммунного и воспалительного ответа и т. д. Вирусные частицы изображены шестиугольниками. Слева  аутокринное действие интерферона: клетка, подвергшаяся вирусной инфекции или антигенной стимуляции, синтезирует в ответ IFN, , , выходящие из клетки и связывающиеся с мембранными рецепторами к интерферонам той же клетки. Справа  паракринное действие интерферона на соседние клетки. Через систему проведения сигнала Jak-STAT от интерферона в ядро клетки индуцируются экспрессия IFN-зависимых генов (локализация которых у человека указана номерами хромосом  Ch) и наработка белков, ответственных за подавление репродукции вируса (cогласно )

можно рассматривать образование барьера из устойчивых к вирусу неинфицированных клеток вокруг очага инфекции для ограничения ее распространения. Интерфероны играют большую роль именно в борьбе с вирусами, а не в предотвращении вирусных инфекций. Образование интерферона могут стимулировать как интактные вирусы, так и инактивированные вирусы, двухцепочечные РНК, синтетические двухцепочечные олигонуклеотиды.

Интерферон неспецифичен, универсален, защищает организм от любых вирусов в первые же часы после заражения, пока не мобилизуются основные силы защиты, а именно антитела, направленные уже против конкретного вируса.

Интерферон не проникает в клетку, а связывается с рецепторами на мембране выделившей его клетки (аутокринное действие) или соседних клеток (паракринное действие), вызывая внутриклеточную продукцию веществ, подавляющих размножение вирусов, и воздействуя на аппарат клетки так, что она становится непригодной для размножения вирусов (см. рис. 4.10).

Пораженная вирусом клетка погибает из-за проникновения в нее вируса, но при этом, вырабатывая интерферон, усиливает защиту соседних клеток от вирусов. Интерферон, выделенный пораженной клеткой, током крови разносится по всему организму и активизирует защитные реакции.

4.2.1. Классификация интерферонов. В зависимости от антигенных и физико-химических характеристик, способа индукции, эффективности и механизмов действия интерфероны подразделяются на два типа: интерфероны I типа  IFN1 и интерфероны II типа  IFN2.

По антигенной специфичности интерфероны делятся на три класса: -лейкоцитарный, образующийся в ядерных клетках крови (гранулоцитах, лимфоцитах, моноцитах); -фибробластный, вырабатываемый клетками кожно-мышечной, соединительной и лимфоидной ткани; -иммунный, синтезируемый Т-лимфоцитами совместно с макрофагами, естественными киллерами. Первые два интерферона относятся к IFN1, последний  к IFN2. Выработка IFN1 индуцируется во всех ядерных клетках в ответ на чужеродную генетическую информацию: высокоэффективными индукторами синтеза интерферона выступают вирусы, двуцепочечные РНК (рис. 4.11), синтетические полинуклеотиды. IFN2 вырабатывается только двумя видами ядерных клеток: Т-лимфоцитами в процессе активации, т. е. при взаимодействии с антигенпредставляющим макрофагом, и естественными киллерными клетками  при взаимодействии с клетками-мишенями. Индукторами -интерферона являются также митогены Т-лимфоцитов: стафилококковый энтеротоксин, некоторые лектины.

Рис. 4.11. Активация с помощью двухцепочечной РНК 2",5"-олиго-аденилатсинтетазы (OAS) и протеинкиназы PKR. OAS катализирует синтез 2",5"-олигоаденилатов, являющихся индукторами рибонуклеазы L путем перевода ее из неактивной мономерной формы в активный димер, гидролизующий мРНК и рРНК. Активированная связыванием с двухцепочечной РНК димерная форма PKR фосфорилирует фактор инициации трансляции eIF2, который, связываясь с фактором инициации трансляции eIF2В в комплекс, ингибирует инициацию трансляции вирусной мРНК на рибосомах (согласно )

Известно около двадцати -лейкоцитарных интерферонов, различающихся первичной последовательностью, типом клеток-продуцентов и типом индуктора. Это кислотоустойчивые, в основном негликозилированные белки молекулярной массой 1825 kDa. Они синтезируются в виде предшественника, от которого отщепляется сигнальный пептид длиной 23 аминокислотных остатка с образованием зрелых интерферонов, содержащих 165166 аминокислотных остатков. У человека наиболее часто встречаются  1 -,  2 -,  3 -интерфероны, содержащие на N-конце молекулы остаток цистеина, участвующего в образовании одной из двух имеющихся в молекуле интерферона дисульфидных связей. Использование восстановителей (например -меркаптоэтанола) приводит к потере активности данного интерферона. -Интерфероны проявляют антивирусную, иммунорегуляторную и антиопухолевую активности.

-Фибробластный интерферон  кислотоустойчивый, гликозилированный белок молекулярной массой 20 kDa, содержащий 166 аминокислотных остатков, синтезируется в виде предшественника. Для образования зрелого белка необходимо отщепление сигнальной последовательности длиной 21 аминокислотных остатка. По своему биологическому действию сходен с -нтерфероном, взаимодействует с теми же клеточными рецепторами, что и последний.

-Иммунный интерферон кислотолабилен, имеет два сайта гликозилирования, поэтому встречается в трех видах: негликозированнный с молекулярной массой 15 kDa, гликозилированный по одному из сайтов (20 kDa) и по обоим сайтам (25 kDa). -Интерферон содержит 143 аминокислотных остатка, отщепление от С-конца пептидов разной длины приводит к гетерогенности препаратов -интер- ферона. После отщепления сигнального пептида, состоящего из 23 аминокислотных остатков, у-интерферона образуется блокированный (не содержит свободной NH 2 -группы) N-конец в виде пиро- глутаматного остатка. -Интерферон действует на другие клеточные рецепторы, нежели- и -интерфероны, и отличается от последних менее выраженной антивирусной и более выраженными иммунорегуляторной и антиопухолевой активностями.

Лейкоцитарный -интерферон кодируется у человека семейством генов (примерно 20), расположенных в хромосоме 9; фибробластный -интерферон  единственным геном, расположенным также в 9-й хромосоме; иммунный -интерферон кодируется единственным геном, но расположенным в хромосоме 12.

4.2.2. Механизм действия интерферона. Противовирусное действие, модуляция иммунного и воспалительного ответов, регуляция пролиферации и дифференцировки клеток осуществляется интерферонами путем стимуляции транскрипции IFN-индуцируемых генов, кодирующих различные белки. Некоторые из этих белков являются транскрипционными факторами, которые участвуют в регуляции экспрессии генов, в том числе и генов IFN. Это приводит к формированию сложной генной сети, регулирующей функционирование системы IFN, т. е. системы регуляции процессов индукции и действия IFN.

Как упоминалось выше, для проявления биологической активности выделенный пораженной вирусом клеткой интерферон должен связаться с мембранными рецепторами этой же или соседних клеток.

4.2.2.1. Янус-киназы (J ak ). В последующей внутриклеточной передаче сигнала участвуют Янус-киназы (Jak), сопряженные с рецепторами IFN/R (JAK1 и Tyk2) и IFNR (JAK1 и JAK2), и факторы транскрипции STAT (сигнальный белок-трансдуктор и активатор транскрипции), от которых сигнал поступает непосредственно к промоторам генов-мишеней в ядре без участия вторичных посредников. Янус-киназы фосфорилируют некоторые остатки тирозина факторов транскрипции, после чего активированные факторы транскрипции переносятся в ядро и индуцируют транскрипцию специфических клеточных генов. Ниже мы подробнее рассмотрим этот путь передачи сигнала от интерферона в ядро.

Семейство Янус-киназ в клетках млекопитающих малочисленно и представлено только четырьмя JAK-белками: JAK1, JAK2, JAK3 и TYK2. Это сравнительно большие киназы, состоящие более чем из 1100 аминокислотных остатков с молекулярной массой 120−130 kDа. JAK имеют семь доменов. Cтруктурная организация Янус-киназы представлена на рис. 4.12. С-концевой тирозинкиназный JH1 домен имеет черты, объединяющие его с другими тирозинкиназными доменами. Отличительной чертой семейства Янус-киназ среди всех тирозинкиназ млекопитающих является существование тандема киназного (JH1) и псевдокиназного (JH2) доменов. Наличие последнего и определяет название Янус-киназ, поскольку только они среди всех тирозинкиназ млекопитающих имеют псевдокиназный домен. Как двуликий Янус, Янус-киназы также имеют "два лица". Функция псевдокиназного домена, по-видимому, заключается в регуляции ка- талитической активности. Мутации или делеции в этом регионе могут приводить к ингибированию или повышению каталитической функции Янус-киназ в зависимости от конкретного расположения возникшей мутации. N-концевой участок Янус-киназы отвечает за связывание JAK с соответствующим рецептором интерферона. На рис. 4.13 приведена модель пространственной структуры JAK1 в комплексе с одним из субстратов, а именно АТР. Из рисунка видно, что N-концевая часть домена состоит из -складчатых структур, в то время как С-концевая часть представлена -спиралями. Активный центр JAK1 расположен в углублении на стыке этих двух структурных областей.

Рис. 4.12. Структурная организация Янус-киназы. JH  область гомологии Янус-киназы (JAK): JH1  киназный домен, JH2  псевдокиназный домен; SH2  домен гомологии 2 src; FERM-domain  участок связывания рецептора интерферона (согласно )

Янус-киназы связываются с рецепторами интерферона после образования комплекса интерферон-рецептор (рис. 4.14). Связывание интерферонов с рецепторами I и II типов предположительно приводит к гомо- или гетеродимеризации субъединиц рецептора, которые оказываются напротив Янус-киназ. Рецептор IFN/ (IFNAR), подобно рецептору инсулина, представляет собой гетеротетрамер, состоящий из двух субъединиц IFNАR1 и двух субъединиц IFNАR2, обозначаемых так же, как - и -субъединицы. Рецептор IFN (IFNGR) является гетеродимером, состоящим из субъединицы

Рис. 4.13. Модель пространственной структуры киназного домена JAK1 в комплексе с АТР. N-конец киназного домена вверху и состоит из -складчатых структур, С-конец внизу и представлен -спиралями (согласно )

IFNGR1 (молекулярной массой 90 kDa) и субъединицы IFNGR2 (молекулярной массой 62 kDa). Янус-киназы находятся в комплексе IFN  IFNR, фосфорилируются, что приводит к повышению их каталитической активности. При гетеродимеризации рецепторов к интерферонам встречается также гетеродимеризация различных JAK, которые при этом активируют друг друга с помощью трансфосфорилирования (в случае IFNАR -субъединица связывается с TYK2; в то время как -субъединица  с JAK1, в случае IFNGR субъединица IFNGR1 связывается с JAK1; а субъединица IFNGR2  с JAK2) (см. рис. 4.14, А , Б1 ). После активации Янус-киназ они фосфорилируют субъединицы рецептора по тирозиновым остаткам, делая возможным cвязывание с фосфорилированным рецептором белков, содержащих SH2- или тирозинсвязывающие домены. В данном случае эти белки  STAT (Signal Transducer and Activator of Тranscription − сигнальный белок-трансдуктор и активатор транскрипции), фосфорилируемые Янус-киназами.

Продолжение подписи к рис. 4.14 см. стр. 25: Янус-киназы в результате образования комплекса активируются, трансфосфорилируют друг друга и фосфорилируют субъединицы рецептора; б , 1 функция IFNАR2 заключается в связывании JAK1 и STAT белков до взаимодействия с интерфероном, но неизвестно, какой остаток Tyr подвергается фосфорилированию; б, 2  с фосфорилированным Tyr466 IFNАR1 взаимодействует STAT2 через свой SH2-домен. Янус-киназа фосфорилирует STAT2 (р113) по Tyr690; б , 3  фосфорилированный STAT2 связывает SH2-домен STAT1 (р91), который также фосфорилируется Янус-киназой по Tyr701. Гетеродимерный комплекс STAT1STAT2 с одним контактом SH2-домен  фосфотирозин отщепляется от рецептора, изомеризуется в комплекс с двумя контактами SH2-домен  фосфотирозин, переносится в ядро, по пути связывает р48 (IRF9) и превращается в фактор транскрипции ISGF3. В ядре ISGF3 взаимодействует с элементом ДНК, называемым ISRE (IFN-stimulated gene response element  область узнавания IFN-зависимых генов), и активирует транскрипцию IFN/-зависимых генов. В случае IFN последовательность событий та же самая с небольшими модификациями. Субъединицы рецептора IFNGR1 и IFNGR2 взаимодействуют с Янус-киназами: JAK1 и JAK2. Последние фосфорилируют STAT1, образующий после модификации гомодимерный комплекс. После транслокации в ядро гомодимер связывается в качестве транскрипционного фактора, называемого GAF (-activation factor  фактор активации интерфероном ), с GAS (-interferon activation site), элементом ДНК, активируемым IFN (согласно )

4.2.2.2. STAT- белки . У млекопитающих имеется 7 STAT: STAT1, STAT2, STAT3, STAT4, STAT5A, STAT5B и STAT6. Отличительными чертами семейства транскрипционных факторов STAT является наличие SH2-доменов и способность к фосфорилированию входящего в их состав тирозина.

Давайте вспомним, что такое SН2-домен. SН2-домен (домен, гомологичный второму домену белка Src)  второй модулирующий участок (аминокислотные остатки 141260), который контролирует спектр белков, взаимодействующих с семейством Src (вируса саркомы Рауса). SH2-домены белков узнают короткую аминокислотную последовательность, несущую фосфотирозин. Специфичность индивидуальных SН2-доменов определяется тремя-пятью остатками, следующими за тирозином. За счет взаимодействия SH2-доменов одних молекул STAT с фосфотирозинсодержащими последовательностями других молекул STAT образуются гомо- и гетеродимеры.

Рис. 4.15. Пространственная структура димера STAT1 в комплексе с ДНК (изображена кругом посредине структуры). Спираль-спиральный домен внизу по бокам структуры белка, ДНК-связывающий домен  в центре , линкерный домен  выше над ДНК-связывающим доменом, SH2- и тирозинактивирующий домены  вверху . Буквами N и С обозначены концы димеров STAT (согласно )

Биохимическими, генетическими и рентгеноструктурными исследованиями было установлено, что молекула STAT состоит из семи консервативных доменов: N-концевого, спираль-спирального, ДНК-связывающего, линкерного, SH2-, тирозинактивирующего и активирующего транскрипцию. Пространственное строение димерной формы STAT приведено на рис. 4.15. Каждый из доменов STAT играет определенную роль в функционировании этого белка. Так, N-концевой домен участвует в димеризации неактивных мономерных форм STAT, во взаимодействии с элементом ДНК GAS, а также в транспорте STAT-димеров в ядро и из него. Спираль-спиральный домен, состоящий из четырех -спиралей и образующий протяженную гидрофильную поверхность, ответственен за связывание с регуляторными соединениями, например, с p48 (IRF9) во время образования активного транскрипционного фактора ISGF3. ДНК-связывающий домен содержит антипараллельные -складчатые слои, подобно тем, которые наблюдаются у вариабельного домена иммуноглобулина G (для сравнения см. рис. 4.3). Этот домен непосредственно связывается с GAS в промоторной части IFN-индуцируемых генов. Наиболее консервативным доменом в структуре STAT выступает SH2-домен, с помощью которого осуществляется взаимодействие с мембранным рецептором цитокинов (в данном случае рецептором интерферона), что позволяет активировать STAT путем фосфорилирования остатков тирозина с последующей димеризацией мономерных форм STAT. Тирозинактивирующий домен, содержащий остатки тирозина, также способствует ассоциации отдельных молекул STAT в активные олигомерные формы. Активирующий транскрипцию домен (TAD), расположенный на С-конце молекулы STAT, является наиболее вариабельным доменом у белков, входящих в семейство STAT, так как позволяет связывать всевозможные активаторы транскрипции (ацетилтрансферазы гистонов, СВР/р300 и т. д.). Кроме того, фосфорилирование некоторых остатков Ser в TAD увеличивает стабильность молекулы STAT, в то время как отсутствие модификации в этом домене приводит к быстрой убиквитин-зависимой деградации белка.

STAT белки находятся в цитоплазме в неактивном состоянии. После активации Янус-киназами STAT димеризуются: в случае IFN/ образуется комплекс STAT1 (р91)  STAT2 (р113) с одним контактом SH2-домен  фосфотирозин. Димер покидает рецептор, при этом происходит изомеризация в комплекс STAT1STAT2 с двумя контактами SH2-домен  фосфотирозин (ISGF3), который транслоцируется в ядро, взаимодействуя с представителем семейства IFN-регулируемых факторов р48 (ISGF3, Interferon Stimulated Gene Factor  генный фактор, стимулированный интерфероном), образует активный транскрипционный фактор ISGF3, взаимодействующий с элементом ДНК, расположенным в промоторной части IFN/-зависимых генов и получившим наименование ISRE (IFN-Stimulated gene Response Element  область узнавания IFN-зависимых генов) (см. рис. 4.14). Все три белка, принимающие участие в образовании гетеромерного комплекса ISGF3, контактируют с ДНК. ISRE представляют собой 1314-нуклеотидные последовательности c консенсусом AGTTTCNNTTTCNPy. В случае IFN из двух модифицированных молекул STAT1, как видно из рис. 4.14, образуется транскрипционный фактор GAF (-activation factor  фактор активации интерфероном ), проникающий в ядро клетки, где он связывается в промоторной области IFN-зависимых генов с GAS (-interferon Activation Site  участок активации интерфероном ), элементом ДНК, активируемым IFN. Эти элементы представляют собой палиндромную последовательность ТТ(N) n АА.

4.2.3. Продукты IFN- индуцируемых генов . Индукция интерфероном специфических генов вызывает два типа ответов: ранний (первичный) и поздний (вторичный). При раннем ответе индукция генов связана с активацией латентных транскрипционных факторов, осуществляемой несколькими путями: 1) удалением белка, маскирующего действие фактора; 2) модификацией фактора; 3) формированием гомо- или гетеромерных транскрипционных комплексов. При позднем ответе индукция генов связана с индуцированным синтезом транскрипционных факторов, отсутствующих в нестимулированной клетке.

Как уже говорилось выше, действие интерферонов приводит к активации транскрипции IFN-зависимых генов. Продуктами этих генов являются транскрипционные факторы, ферменты, нуклеотид- связывающие белки, антигены главного комплекса гистосовместимости классов I и II, регуляторные белки, лимфоцитарные антигены, некоторые цитокины и их рецепторы, Fс-рецепторы, высокоаффинные к IgG.

С помощью продуктов IFN-индуцируемых генов осуществляется весь спектр биологических активностей IFN: развитие противовирусного состояния; ингибирование клеточной пролиферации; модуляция иммунного и воспалительного ответов; стимуляция фагоцитоза и представление антигенов макрофагами; активация цитотоксичности натуральных киллеров; регулирование дифференцировки Т- и В-лимфоцитов.

С развитием противовирусного состояния связана индукция синтеза некоторых ферментов, участвующих в подавлении репродукции вируса: 2",5"-олигоаденилатсинтетазы, дцРНК-зависимой протеинки-назы PKR (протеинкиназы фактора инициации синтеза белка  еIF2), РНК-зависимой дезаминазы (ADAR), белков Мх.

4.2.3.1. 2",5"-Олигоаденилатсинтетаз а. В присутствии двухцепочечной РНК, служащей индуктором для 2",5"-олигоаденилатсин-тетазы (OAS) (в незараженных вирусом клетках фермент не активен) (cм. рис. 4.11), фермент катализирует полимеризацию АТР с образованием олигоаденилатов с необычной 2",5"-фосфодиэфирной связью (схема 1).

(1)

В клетке существует несколько изоформ OAS, различающихся размерами: малая (р40/р46), средняя (р69), большая (р100). Каждая из изоформ кодируется своим IFN-индуцируемым геном. Кроме того, в результате альтернативного сплайсинга каждого гена внутри каждого типоразмера OAS существует множество форм фермента, различающихся С-концевыми последовательностями. В нативной форме малая OAS существует как тетрамер, средняя как димер, а большая форма представляет собой мономер.

По своему пространственному строению и механизму действия OAS относится к семейству ДНК-полимеразы . Каталитическая реакция синтеза 2",5"-олигоаденилата осуществляется триадой остатков глутаминовой кислоты (D74, D76, D147), что является характерной особенностью механизма действия большинства ДНК- и РНК-полимераз. На рис. 4.16 представлена пространственная структура OAS (р40). В отличие от протеинкиназы PKR OAS не имеет отдельного домена для связывания индуктора  двухцепочечной РНК, содержащей не менее 30 пар нуклеотидов. Индуктор связывается в положительно заряженной бороздке фермента, далее после изменения конформации открывается вход в активный центр OAS.

Рис. 4.16. Пространственная структура OAS (р40). N-концевая последовательность изображена внизу , начиная с цифры 1, каталитический домен с триадой остатков глутаминовой кислоты (D74, D76, D147)  слева , линкерный домен  вверху , С-концевой домен  справа (согласно )

В зависимости от размера белка варьирует длина 2",5"-олигоаде- нилата, синтезируемого OAS: от гексамера, синтезируемого процессивно малой OAS, до 30-мера, образуемого непроцессивно средней формой. Большая форма синтезирует димерный 2",5"-олигоаденилат, который не способен быть индуктором для других ферментов, поэтому участие р100 в активации белков, ответственных за противовирусное действие интерферона, пока остается неясным.

2",5"-Олигоаденилаты, содержащие не менее трех нуклеотидных остатков, активируют латентную рибонуклеазу L, переводя ее из неактивной мономерной формы в активный димер, разрушающий одноцепочечные РНК (мРНК и рРНК) как вирусного, так и клеточного происхождения с образованием на 3"-конце последовательности UpU или UpA. Распад РНК приводит к ингибированию элонгации и снижению скорости синтеза белков, в том числе вирусных. Фермент конституционно присутствует в большинстве клеток и увеличивает свою активность в десятки раз при взаимодействии клеток с интерфероном.

Рибонуклеаза L, белок молекулярной массой 83 kDa, содержит 741 аминокислотный остаток. Белок состоит из трех доменов: N-концевого регуляторного, содержащего девять анкирин-подобных участков; протеинкиназоподобного и С-концевого РНК-азного (рис. 4.17).

Рис. 4.17. Доменная структура рибонуклеазы L. N-концевой регуляторный домен, состоящий из девяти анкирин-подобных участков (анкириновые повторы), связывает активатор  2",5"-олигоаденилат (2-5A сенсор). Центральный протеинкиназоподобный домен необходим для димеризации и активации рибонуклеазы L. Каталитический РНК-азный домен расположен на С-конце молекулы фермента (согласно )

Что же такое анкириновый повтор? Анкириновые повторы, сформировавшиеся в ходе эволюции как универсальный белковый модуль, обеспечивают взаимодействия между белками, а также между белками и нуклеиновыми кислотами и достаточно часто присутствуют в структуре различных белков. Каждый анкириновый повтор состоит из двух -спиралей, между которыми находится петля -шпильки. Множественные повторы создают структуру, в которой спираль-спиральные взаимодействия формируют центральное ядро, а концы -шпилек, экспонированные наружу, служат сайтами для взаимодействий белок-белок и белок-нуклеиновая кислота. Модельная структура анкиринового повтора и структура N-концевого регуляторного участка рибонуклеазы L, содержащего несколько анкириновых повторов, приведена на рис. 4.18.

Рис. 4.18. Структура анкиринового повтора: модельная теоритическая структура анкиринового повтора (слева ); структура N-концевого регуляторного домена рибонуклеазы L, содержащего девять анкирин-подобных участков, в комплексе с 2",5"-олигоаденилатом, полученная методом рентгеноструктурного анализа (справа ). Каждый анкириновый повтор состоит из двух -спиралей, между которыми находится петля -шпильки. Спираль-спиральные взаимодействия формируют центральное ядро, изображенное слева в виде цилиндра, а концы -шпилек создают участки для взаимодействий белок-белок и белок-нуклеиновая кислота. Справа видно, что 2",5"-олигоаденилат образует контакты с -шпильками анкириновых повторов R2 и R4 (согласно )

Биохимическими, генетическими и рентгеноструктурными исследованиями было обнаружено, что второй и четвертый анкирин-подобные участки связывают активирующий РНКазу L 2",5"-олиго-аденилат (рис. 4.18). Как видно на рис. 4.19, в отсутствие активатора регуляторный домен РНК-азы L (ANK) взаимодействует с протеинкиназоподобным (РК) и РНК-азным (RN) доменами, препятствует димеризации белка и образованию активного центра на поверхности раздела двух RN доменов. Связывание 2",5"-олигоаденилата в регуляторном домене вызывает изменение конформации этого домена, его компактизацию и высвобождение протеинкиназоподобного и РНК-азного доменов, которые способны теперь к димеризации и переходу в активное состояние, так как каталитически активный РНК-азный центр формируется из аминокислотных остатков димера РНК-азы L. РНК-аза L может связывать свои субстраты в отсутствие активатора, но гидролизовать их не способна, так как для этого необходима димеризация фермента, имеющая место только в присутствии 2",5"-олигоаденилата.